Les moisissures sont des biocontaminants courants des environnements intérieurs mis en cause dans la biodégradation des matériaux qu’ils colonisent et dans la survenue de diverses pathologies, notamment respiratoires. Actuellement, les connaissances sur les espèces microbiennes mises en jeu et les étapes de colonisation conduisant à une contamination fongique visible dans des environnements intérieurs sont réduites. Dans ce contexte, l’objectif de ce travail a été d’étudier et de comprendre la dynamique de colonisation microbienne des supports afin d’élaborer de nouveaux traitements préventifs adaptés aux environnements intérieurs. Pour cela, un banc et des protocoles d’essai ont été développés afin d’assurer le suivi des contaminations fongiques et bactériennes sur différents matériaux, dans deux configurations. Ainsi, une contamination dans des conditions réelles d’exposition a été réalisée sur six supports. Des analyses en microscopie, culture et biologie moléculaire ont alors été effectuées sur une période de 23 jours. Ces analyses ont montré une croissance microbienne sur l’ensemble des matériaux testés avec une augmentation des charges bactérienne et fongique durant l’essai. Cette campagne a également permis d’identifier la toile de verre et le bois comme les matériaux les plus vulnérables vis-à-vis de la prolifération fongique. Ces deux produits ont été utilisés pour l’étude de la dynamique de colonisation et pour éprouver l’efficacité de traitements à base d’ail et d’huiles essentielles. La diversité bactérienne et eucaryote présente sur des coupons de bois et de toile de verre a été caractérisée par séquençage haut débit. Les résultats ont montré une diversité caractérisée par un écosystème dynamique complexe composé de bactéries et d’eucaryotes. Concernant les traitements préventifs du développement fongique testés, des différences d’efficacité ont été constatées entre les deux supports. Ainsi, si aucun effet n’a été constaté sur la toile de verre, deux des trois traitements testés semblaient efficaces sur le bois. Compte tenu de l’efficacité, a priori ciblée, des solutions traitantes testées et de la grande diversité microbienne, le recours à un traitement à spectre d’action large apparait indispensable pour prévenir le développement fongique. L’étude des mécanismes de croissance fongique pourrait également constituée une approche pertinente pour affiner le choix des traitements préventifs.